ELISA試劑盒的洗版解答問題

問題一：說明書上說洗板時(shí)要把孔里的水甩干，可我做的時(shí)候，無論我怎么拍，孔底還是有殘留液體，請(qǐng)問這對(duì)試驗(yàn)有沒有影響？或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個(gè)問題？

答：有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好，會(huì)出現(xiàn)非特異.ELISA試驗(yàn)中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是*后一次洗滌要盡量干.洗滌中另一個(gè)值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話，可用洗板機(jī)。

問題二：什么才叫封閉好了呢?有沒有什么標(biāo)準(zhǔn)?

答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果還有非特異反應(yīng)的話，可能有其他原因，比如加樣時(shí)濺到了壁上或有氣泡，洗滌不充分，二抗?jié)舛冗^高，封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/p>

問題三：1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多.

答：1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作，背景高不一定是封閉的問題。

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