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利用組織樣本來(lái)進(jìn)行Westernblot，這是許多實(shí)驗(yàn)室常常開(kāi)展的工作。不過(guò)，若是想獲得重復(fù)可靠的印跡結(jié)果，也絕非易事。在此，Bio-Rad的專家貢獻(xiàn)了一些經(jīng)驗(yàn)，可以幫助您獲得清晰的圖像和可靠的數(shù)據(jù)。1.快速處理組織使用干凈的工具來(lái)收集和處理組織樣本。為了去除可能影響蛋白穩(wěn)定性的污染物，用預(yù)冷的中性緩沖液簡(jiǎn)單洗滌。洗滌后，在液氮中快速冷凍組織，以便保留蛋白的結(jié)構(gòu)和特征，比如翻譯后修飾（PTM）。組織樣本可保存在冰上，立即勻漿處理。若保存在–20°C，蛋白仍然有可能降解，因此組...

Elisa試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原的原理與步驟當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽(yáng)性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的，可直接包被固相。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì)，直接包被不易成功，可采用捕獲包被法，即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體，然后加入抗原，形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質(zhì)，然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗...

為了獲得單一類型微生物，即純培養(yǎng)物，微生物學(xué)家通常采用稱作富集培養(yǎng)的技術(shù)。為了富集，首先要選擇好適合對(duì)象微生物的培養(yǎng)基，稱為選擇性培養(yǎng)基。例如，當(dāng)我們想分離有固氮作用的細(xì)菌時(shí)，在培養(yǎng)基中可以加糖，但不能用含氮的營(yíng)養(yǎng)物。又如培養(yǎng)厭氧菌時(shí)要隔絕氧氣，而好氧菌則要保證通氣。此外，某些特定微生物需要特殊的營(yíng)養(yǎng)物，例如許多致病菌必須在培養(yǎng)基中加入血清，有些微生物又需要特定的維生素。還有細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)繁殖一般要求偏堿（7.0～7.5），霉菌和酵母菌要求偏酸（4.5～6）；分離放線菌時(shí)...

Elisa試劑盒具有敏感性高，特異性強(qiáng)，快速等特點(diǎn)，目前廣泛應(yīng)用于農(nóng)獸藥、真菌殘留檢測(cè)。但該方法從加樣、洗板、顯色到讀數(shù)步驟繁多，其中任何一步控制不好都可能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，在實(shí)際測(cè)定操作中一定要注意以下幾點(diǎn)。一、溫度1.試劑盒回溫大多數(shù)ELISA檢測(cè)試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來(lái)后，先不要急于打開(kāi)試劑盒，要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無(wú)冷凝水。檢測(cè)所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。提前1~2小時(shí)取出試劑盒，放在室溫中；或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培...

能夠還原斐林(H.vonFehling)試劑(本尼迪特試劑）或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖，所有的單糖（除二羥丙酮），不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖，蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡(luò)合物的溶液，被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后能生成單質(zhì)銀，發(fā)生“銀鏡反應(yīng)”。分子結(jié)構(gòu)中含有還原性基團(tuán)（如游離醛基或游離酮基）的糖，叫還原糖。如葡萄糖。果糖含有游離的酮基，所以果糖也屬于還原糖。還原性質(zhì)一般情況下，單糖的還原能力主要來(lái)自它的醛基，...

化學(xué)試劑在貯存過(guò)程中是否會(huì)發(fā)生變質(zhì)，取決于內(nèi)外兩個(gè)方面的因素，內(nèi)因是試劑本身化學(xué)結(jié)構(gòu)所決定的理化性質(zhì)；外因則是試劑所處的環(huán)境條件。要做到合理保管，一要了解試劑結(jié)構(gòu)與性質(zhì)間關(guān)系，二要?jiǎng)?chuàng)造適應(yīng)試劑貯存的外部環(huán)境。化學(xué)試劑變質(zhì)的原因環(huán)境主要是指貯存的溫度、光照和介質(zhì)。介質(zhì)一般是指空氣和混有的雜質(zhì)。貯存室里除空氣中含有的氧、二氧化碳和水蒸氣以外，還往往含有存放的各種揮發(fā)性試劑擴(kuò)散到空氣中的蒸氣，常見(jiàn)的有氯化氫、硝酸、硫化氫、二氧化硫、溴、dian、乙烯、甲醛等蒸氣；另外還有飄混在空氣...