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牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用及產(chǎn)生的常見問題(1)
2011-4-12
2278
現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程,這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切的關(guān)系,特別是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多都是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO細(xì)胞作為載體;基因工程抗體藥物的制備也離不開細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞工程領(lǐng)域更離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),雜交瘤單克隆抗體的研究制備*是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)??傊?,細(xì)胞培養(yǎng)在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的...
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成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟
2011-4-11
2179
成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟1、細(xì)胞的制備;細(xì)胞的來源:采用流產(chǎn)人胚胎(5-7月胎齡)胰腺組織,于解剖顯微鏡下去除周圍的脂肪和結(jié)締組織。輕輕地分離并切碎胰腺,膠原酶370C震胰蕩消化30分鐘,然后加冷牛血清和Hanks液保護(hù)細(xì)胞并終止消化。此方法不但可以分離外分泌腺,還可以降低免疫原性從而減少免疫排斥反應(yīng)。1500轉(zhuǎn)離心10分后棄上清,用生長(zhǎng)液保存具有生理功能的細(xì)胞備用,達(dá)到細(xì)胞量再行植入。2、胰腺干細(xì)胞的制備:由于胚胎數(shù)量不足,往往不能滿足胰島細(xì)胞種植的需要,就須在體外進(jìn)行擴(kuò)增...
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小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果
2011-4-11
1789
小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果各組分離的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)均有集落形成,肝干細(xì)胞的表面標(biāo)記提示形成的集落具有肝干細(xì)胞特性。其中以第15天胚胎肝臟分離所獲的細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)形成的集落數(shù)zui多、生長(zhǎng)狀態(tài)。15d后觀察的各項(xiàng)指標(biāo)漸減,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)漸差。結(jié)論早期胚胎肝臟中大部分是具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞,隨胎齡增加,有干細(xì)胞特性的細(xì)胞逐漸減少,直至出生第5天僅有少數(shù)保持未分化狀態(tài)的細(xì)胞存留在肝臟內(nèi)。
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蛋白質(zhì)定義及概述
2011-3-23
2248
蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物,舊稱“朊(ruǎn)”。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個(gè)氨基酸殘基(-R)不等;各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由對(duì)應(yīng)基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本氨基酸,在蛋白質(zhì)中,某些氨基酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā)生化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化,從而對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行激活或調(diào)控。多個(gè)蛋白質(zhì)可以一起,往往是通過結(jié)合在一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)復(fù)合物,折疊或螺...
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抗生素檢測(cè)
2011-3-22
2608
β-內(nèi)酰胺類抗生素快速檢測(cè)試紙條基于膠體金免疫層析技術(shù),用于快速篩查β-內(nèi)酰胺類抗生素超標(biāo)的牛奶。將檢測(cè)液加入試紙卡上的樣品孔,檢測(cè)液中的β-內(nèi)酰胺類抗生素與膠體金墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,若β-內(nèi)酰胺類抗生素在檢測(cè)液中濃度低于4ng/mL,未結(jié)合的金標(biāo)抗體流到T區(qū)時(shí),被固定在膜上的β-內(nèi)酰胺類抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合,逐漸凝集成一條可見的T線;若β-內(nèi)酰胺類抗生素濃度高于4ng/mL,金標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物,不會(huì)再與T線處的β-內(nèi)酰胺類抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合,從而也就...
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免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)
2011-3-22
1786
該技術(shù)的主要特點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是:非特異性染色問題尚未完*,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同,還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡(jiǎn)便,便于推廣。國(guó)外生產(chǎn)的TDM用試劑盒,有相當(dāng)一部分即屬于此類,并且還有TDM熒光偏振免疫分析用的自動(dòng)分析儀生產(chǎn)。由于一般熒光測(cè)定中的本底較高等問題,熒光免疫技術(shù)用于定量測(cè)定有一定困難。近年來發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測(cè)定,與酶免疫測(cè)定和...