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  • ELISA試劑盒蛋白質(zhì)純化與結(jié)晶的培養(yǎng)原理
    2013-11-19 1211
    ELISA試劑盒獲得蛋白質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)的*個瓶頸,就是制備大量純化的蛋白質(zhì)(10mg),其濃度通常在10mg/ml以上,并以此為基礎(chǔ)進行結(jié)晶條件的篩選。運用重組基因的技術(shù),將特定基因以選殖(clone)的方式嵌入表現(xiàn)載體(expressionvector)內(nèi),此一載體通常具有易于調(diào)控的特性。之后再將帶有特定基因的載體送入可快速生長的菌體中,如大腸桿菌(Escherichiacoli),在菌體快速生長的同時,也大量生產(chǎn)表現(xiàn)載體上的基因所解譯出之蛋白質(zhì)。一般而言純度越高的蛋白質(zhì)比較...

  • 用elisa試劑盒檢測樣本的原理和步驟
    2013-11-18 1265
    1.elisa試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過多,可使用多道移液器。3.孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進行孵育,嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。4.洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,...

  • ELISA試劑盒實驗重復性差的原因分析及解決方法
    2013-11-15 3162
    1、ELISA試劑盒樣品數(shù)量不一,加樣時間長短不一;重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。2、樣品加入后未混勻;加樣后在混勻器上充分混勻。3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對;TMB顯色用450/630波長.4、酶標儀測定重復性差;校對酶標儀。5、洗滌不正確;洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔,洗滌應充分。6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱)恒溫箱溫育較水浴顯色深...

  • 酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理
    2013-11-14 1122
    酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量...

  • ELISA試劑盒實驗操作中常見問題明細
    2013-11-13 1232
    由于ELISA試劑盒具有靈敏度較高、特異性好的特點,已廣泛應用于各種傳染性疾病的篩查如肝炎、愛滋、優(yōu)生優(yōu)育等。雖然洗板只是ELISA實驗重要環(huán)節(jié)中的一個,但作為專業(yè)的洗板機生產(chǎn)廠家,我們必須對影響ELISA實驗結(jié)果各因素有一定的認識。的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準確可靠的必要條件。如不注意,就易出現(xiàn)白板、花板、色弱和假陽性等現(xiàn)象。尤其是花板現(xiàn)象(就是空白、陰性、陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常,而標本孔的OD值卻明顯偏高)是各個廠家洗板機調(diào)試中經(jīng)常遇到...

  • ELISA試劑盒液體標本的收集
    2013-11-12 1180
    ELISA試劑盒液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2、血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3、尿液:[1]用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)...

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